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《细胞生物学实验》分为基础性实验和综合性实验两部分，其中基础性实验分为9章36个实验，是细胞生物学中最基本的实验技术。综合性实验6个，实验中需要综合应用多种研究技术，对培养学生的综合能力、动手能力、分析和解决问题的能力很有帮助。《细胞生物学实验》可作为高等院校生命科学类专业本科细胞生物学基础实验课程的教材，特别适合师范院校生命科学专业的学生使用，也可供相关科研及实验技术人员参考。

前言

第1部分 基础性实验

第一章 显微镜技术

实验1 普通光学显微镜及其使用

实验2 光学显微镜标本的制作技术及HE染色

实验3 特殊显微镜的原理和使用

实验4 激光扫描共焦显微镜的原理与使用

实验5 透射电镜的原理与使用

实验6 扫描电镜的原理与使用

第二章 细胞形态与结构的观察

实验7 不同细胞形态的观测及大小的测量

实验8 线粒体和液泡系的活体染色与观察

实验9 叶绿体的分离纯化与荧光观察

实验10 考马斯亮蓝染色显示植物细胞骨架及其光镜观察

实验11 间接免疫荧光标记法显示动物细胞中的微管

第三章 细胞化学

实验12 甲基绿-派洛宁染色显示DNA和RNA在细胞中的分布

实验13 Feulgen反应显示细胞中DNA的分布

实验14 PAS反应显示细胞中糖原的分布

实验15 脂类的细胞化学

实验16 酶的细胞化学——酸性磷酸酶的显示

第四章 细胞膜生理

实验17 活细胞与死细胞的鉴定

实验18 细胞膜的通透性

实验19 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察

实验20 植物凝集素对红细胞的凝集作用

第五章 细胞分裂及染色体标本的制备

实验21 有丝分裂

实验22 减数分裂

实验23 植物根尖染色体标本制备

第六章 细胞培养

实验24 动物细胞原代培养

实验25 动物细胞传代培养

实验26 动物细胞冻存与复苏

实验27 植物细胞悬浮培养

第七章 核酸、蛋白质的原位检测

实验28 原位杂交

实验29 免疫组织与细胞化学技术

第八章 细胞的分选与分析——流式细胞技术

实验30 流式细胞仪测定细胞周期

第九章 细胞凋亡的检测

实验31 细胞凋亡的形态学观察

实验32 凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA ladder

实验33 凋亡细胞原位末端标记法检测——TUNEL

实验34 流式细胞仪检测细胞凋亡

实验35 线粒体膜电位检测细胞凋亡

实验36 caspase-3活性测定检测细胞凋亡

第2部分 综合性实验

实验37 低温诱导植物根尖细胞染色体数目加倍

实验38 动物细胞融合(PEG介导的鸡血细胞融合)

实验39 动物骨髓细胞染色体标本制作

实验40 抑制肿瘤细胞增殖有效成分的筛选

实验41 植物原生质体分离、融合与培养

实验42 增殖细胞核抗原(PCNA)与海洋浮游植物生长之间的关系

主要参考文献

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第1 部分 基础性实验

第一章 显微镜技术

显微镜是观察细胞形态结构的基本工具，有了光学显微镜的发明才有细胞的发现，有了石蜡切片技术和各种染色技术的发明才使得对细胞的内部结构有了一定的认识，电子显微镜的发明和超薄切片技术的出现则加深了人们对细胞细微结构的了解。相差显微镜、微分干涉显微镜和显微操作仪的发明使得对活细胞的观察及外科手术操作变为可能。荧光显微镜在核酸和蛋白质等生物大分子的定位与定性研究方面发挥了重大作用。激光扫描共焦显微镜使得观察活细胞内各种细胞器和生物大分子的动态结构及活动成为可能。

显微镜是细胞生物学研究中最基本的实验工具。掌握显微镜的调试和使用的基本技能，了解各种不同的光学显微镜及电子显微镜的基本原理、特点和应用范围，对于细胞生物学的学习和研究是十分必要的。

实验1 普通光学显微镜及其使用

【实验目的】

1. 了解普通光学显微镜的构造、基本原理、保养方法，掌握光学显微镜的使用方法。

2. 熟悉光镜下细胞的基本形态和结构。

【实验原理】光学显微镜由光学放大系统和机械装置两部分组成。光学系统一般包括目镜、物镜、聚光镜、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等。标本的放大主要由物镜完成，聚光镜能使光线照射标本后进入物镜，形成一个大角度的锥形光柱。物镜上方形成一个倒立的放大实像，目镜将此倒像进一步放大成像于人的视网膜上，形成一个正立的实像。判断显微镜性能最重要的指标是分辨率，它主要由物镜决定，实际使用中也与聚光镜相关。

分辨率可用下式表示：R=0.61λ/NA，R 值越小，分辨率越大。λ 为入射光的波长，NA 为物镜的数值孔径。NA=n ? sin（α/2），n 为介质的折射率，α 为镜口角的大小。

【实验用品】

1. 实验器具普通光学显微镜。

2. 实验试剂香柏油、镜头清洗液（乙醚∶无水乙醇=7∶3，或二甲苯）。

3. 实验材料各种动植物组织细胞或微生物永久装片或临时装片。

【方法与步骤】

1. 普通光学显微镜的基本构造

普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分，详见图1-1。

2. 显微镜的使用方法

（1）聚光镜的使用方法聚光镜是光学显微镜照明光路中的重要部件，聚光镜没有调整好会影响显微镜的实际分辨率，也使视野中因杂散光的存在而产生晕光。

1）聚光镜的对中①调出清晰的多边形

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　　本书内容主要包括基础性实验和综合性实验两部分。基础性实验包括各种显微镜的使用、细胞形态和结构的观察、细胞化学、细胞膜生理、细胞分裂、细胞培养、生物大分子的原位检测、细胞的分选和分析及细胞凋亡的检测共9章36个实验，这里面既有传统的细胞生物学经典实验，也有现代细胞生物学研究的新技术、新方法，是*能代表本学科特点的实验方法和技术。

书籍介绍

《国家级实验示范中心配套教材:细胞生物学实验》分为基础性实验和综合性实验两部分，其中基础性实验分为9章36个实验，是细胞生物学中最基本的实验技术。综合性实验6个，实验中需要综合应用多种研究技术，对培养学生的综合能力、动手能力、分析和解决问题的能力很有帮助。

《国家级实验示范中心配套教材:细胞生物学实验》可作为高等院校生命科学类专业本科细胞生物学基础实验课程的教材，特别适合师范院校生命科学专业的学生使用，也可供相关科研及实验技术人员参考。